荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）是一种重要的分子生物学技术，可以对单个细胞或组织中的目标DNA序列进行高度特异性的检测和定位。

一、原理

FISH利用荧光的特性，将荧光标记的探针与待检测的核酸序列互补结合，通过光学显微镜观察标记物的荧光信号，可以实现基因组检测、染色体分析等应用。

二、标记 ***

FISH通常使用有机荧光染料（如荧光素（Fluorescein）、罗丹明（Rhodamine）等）或荧光蛋白（如绿色荧光蛋白，GFP）来标记探针，目前已经开发出多种具备不同荧光颜色和相应的滤光片的探针。

三、实验步骤

FISH实验包含制备探针、组织或细胞样本的预处理、杂交反应、高温洗脱和图像获取等步骤。首先，利用PCR扩增或合成DNA、RNA序列，然后用荧光标记或生物素标记进行标记。接下来，对组织或细胞样品进行预处理（如蛋白酶消化、脱水和变性处理等），将标记好的探针加入样品中，进行杂交反应。然后，高温洗脱（washing）杂交反应中未被结合的探针，最后通过荧光显微镜或激光共聚焦显微镜等进行图像获取。

四、应用

FISH技术在医学诊断、癌症筛查及基因组分析等方面有广泛应用。例如，可以用FISH探针进行染色体异常的检测、基因缺失和扩增的分析、测定哺乳动物性别等。

总之，FISH技术在不同生物学领域中得到了广泛应用，对分子生物学研究起到了重要作用。